通过 FLIM-FRET 探究分子间相互作用
现代研究探讨分子如何相互作用以完成重要任务。成功的生物医学研究利用FLIM-FRET来探索这些相互作用。 SP8 FALCON 为 FLIM 仪器设定了新的速度标准。 它使 FRET 成为高度动态细胞事件。您可在日常实验中采集和解读FRET数据。 |
利用生物传感器监测细微而快速的变化
生物传感器是报告代谢活动、信号传导机制、pH和微环境变化的强大工具。 SP8 FALCON 可采集荧光寿命包含的这一类信息,甚至包括膜电位动态等超快事件。该信息补充了 SP8 平台提供的功能强大的光谱成像。 |
利用生物传感器监测细微而快速的变化
在传统成像中自发荧光是一个问题。SP8 FALCON 将其转化为有价值的信息。 您现在可以将自发荧光转化为代谢状态、细胞分化和癌症发展的报告工具。 此外,SP8 FALCON 支持活体组织成像对比,其中荧光标记往往不具特异性或破坏生理条件。 直接采用相量定义寿命 在 SP8 FALCON 中使用FLIM 相量进行分析,可提供寿命分量的二维视图。可以使用 FLIM相量跟踪微环境变化、选择多路传输信号的分量、确定 FRET 效率。 相量 FLIM 可以提高 STED 图像的分辨率。可在较低 STED 耗散功率条件下达到同样的分辨率(Lanzanò等, Nature 2015)。 |
借助光谱以外的方法分离荧光团
荧光标记是区分细胞内结构的标准方法。光谱分离非常强大,但有时,如果发射光谱太靠近时则受到限制。 拥有 SP8 FALCON,您可以利用额外的荧光寿命维度来克服这种限制。这提供了分离多个荧光探针的可能性。 通过综合运用 SP8 平台的各种选项,您可以享受更多的自由。选项包括白光激光激发源、声光分束器和多通道光谱检测。 图像:经由寿命对比区分的细胞骨架结构。波形蛋白以 Alexa Fluor 555 免疫标记(绿色),微管蛋白以 Alexa Fluor 546 免疫标记(蓝色)。荧光团的光谱相似度很高,但利用荧光寿命信息可将其区分开。图像大小:512 x 512 像素。 |
SP8 FALCON成像是快速寿命对比方法 SP8 FALCON 显微镜克服了 FLIM 的速度限制,打开快速采集寿命数据的大门。 由于 FLIM 的技术限制,目前从快速过程的荧光寿命数据提取功能信息还比较困难。FLIM 采集速度至少比记录共聚焦强度慢 10 倍。 采用 SP8 FALCON 快速寿命对比成像,可以以适当的速度跟踪细胞中的动态过程。这些任务之所以能够完成,是因为采取了利用时间相关单光子计数法(TCSPC)测量时间的新方法,以及用于数据处理和分析的智能算法。 |
一体化多模态成像
将 FLIM 与其他模态结合,难度高于与 SP8 FALCON 结合。之前,研究人员仍不得不处理复杂的布线问题和繁琐的文件传输任务。拥有 SP8 FALCON,您可以将寿命信息集成到标准共聚焦工作流中。 SP8 FALCON 与 LAS X 采集分析软件完全集成。它可以同时记录四个光谱通道的 FLIM,并连续记录多达 10 个通道。使用 SP8 FALCON,您可以对 3D 堆栈、延时序列甚至大型拼图格式文件获得寿命对比信息。 采用新推出的 LAS X NAVIGATOR,可以将您的可视场扩展至 10000 倍,从而节省宝贵的时间来识别您感兴趣的区域,以全新的方式探索您的样品。 |
点击一次即可获取结果
LAS X 软件可以单击进行 FLIM,与常规光谱成像原理相同。即使您将显微技术用作补充技术,也可以立即找到要点并开始成像。更多专业功能可当作工作流进行访问,可出于方便目的进行自动化。 使用 SP8 FCS 研究分子动力学 荧光相关光谱(FCS)是一种显微镜学定量技术。它用于基于强度波动研究离子浓度、扩散系数、粘度、分子质量、结合常数和光物理性质。 FCS 与 FLIM 结合,使荧光寿命相关光谱学(FLCS)实验得以开展。FLCS 用于研究光谱不可分离分子间的相互作用,消除背景贡献。 STED 减小聚焦体积。因此,即使在高浓度范围(>100 nM)共聚焦 FCS 遇到其限制时,STED FCS 也能提供分子信息。 |
新的 Leica FLIM/FCS 解决方案将增强其适用性 —— 速度超快、使用灵活方便。”
—— 牛津大学 Christian Eggeling 教授 大多数FLIM仪器都是附属品,这是一个颠覆性创新:真正集成式系统 —— 功能非常强大!” —— 加利福尼亚大学尔湾分校 Enrico Gratton 教授 据我所知,徕卡 SP8 FALCON 是首个在核心设施中提供共聚焦和寿命成像的商业系统。” —— 洛杉矶南加州大学 Scott E. Fraser 教授 我们仔细研究了徕卡 SP8 FALCON。它与专用 TCSPC 解决方案一样准确,但具有直观的界面且速度极快。”“在我看来,这项技术将改变功能成像的游戏规则。 —— 阿姆斯特丹荷兰癌症研究所 Kees Jalink 教授 |
TCS SP8 系列产品
SP8 FALCON 是 Leica Microsystems SP8 平台的新成员。通过配置,该平台可以适应不同的研究方法,范围从超分辨率共聚焦显微技术到STED 纳米显微技术。
这为用户提供了多功能性和投资保障。基于 SP8 平台的所有仪器均是开放的,无论现在还是将来都能适用于用户的研究需求。