神经科学研究

神经科学家经常需要使用显微镜研究具有挑战性的复杂样本,以便更好地了解神经系统。

徕卡显微系统提供全面的成像解决方案,使您能够克服这些挑战。

神经科学是一个涉及神经系统结构和功能研究的多学科领域。 其目的是理解认知和行为过程的发展,以及理解各种疾病(如阿尔茨海默症或帕金森病)并找到治疗方法。无论是在细胞和亚细胞层面对神经系统成像,还是在环境内观察任何分子变化,显微成像技术的运用都至关重要。 深层组织成像方面的最新发展进一步加深了人们对神经元功能的了解。 遗传学细胞标记和光遗传学等新兴技术为这方面的发展提供了有力补充。

神经科学研究中的成像挑战

神经系统的研究往往需要将高分辨率、深层成像和大切片显示相结合。 您还需要对不同类型的样本灵活成像,例如活细胞、组织、类器官和模式生物。

研究细胞转运或突触重构等快速动态过程时,需要高速显微成像。 高速显微成像的主要挑战之一是采集高分辨率图像,同时避免荧光过曝。

神经科学研究通常涉及广域和容积成像。 对减少荧光散射和背景信号的要求会使采集高对比度和分辨率的图像变得困难,而这一点在检查脑切片等致密组织的神经元结构时又特别关键。

培养的皮质神经元。 Z轴层扫 59 个平面(厚度:21µm)。 样本由德国马格德堡 FAN GmbH 公司提供。
斑马鱼胚胎的伪彩色眼睛。 图像使用 TCS SP8 DLS 采集。 法国伊尔基希-格拉芬斯塔登遗传与分子细胞生物学研究所 (IGBMC) 影像中心 Basile Gurchenkov 博士提供。

神经科学研究中的显微成像方法

神经系统的研究通常依靠共聚焦显微镜对事件和结构进行高分辨率成像。 更深层的体内成像则使用多光子显微镜,因为它能够使用近红外激发,可减少光散射,从而以最小侵入性实现深层成像。 此外,光片显微成像是光敏或 3D 样本的首选方法。 它可减少光毒性,并提供固有的光学切片和 3D 成像。

1、光遗传学是一种涉及到光控神经活动的技术,有助于研究特定的神经元网络和细胞信号传导。 它需要表达神经元细胞膜中的光敏蛋白。 将光遗传学与定时的毫秒精度玻璃化相结合,在纳米尺度下观察事件,这是一项用于研究动态过程中特定时间点的前景广阔的技术。
2、电生理学研究组织和细胞的电特性,包括研究神经元的电特性。 神经和肌肉细胞的功能依靠流经离子通道的离子电流。 研究离子通道的一种方法是使用膜片钳。 这种方法可以详细研究离子通道,并记录不同类型细胞的电活动,主要是神经元之类的可兴奋细胞。

THUNDER 成像系统
SP8 DIVE(Deep In Vivo Explorer)
Mica

培养的皮层神经元,其中绿色表示 beta-III-tubulin,蓝色表示细胞核。 59 个平面的层扫图像,体积为 21 µm³。 样本由德国马格德堡 FAN GmbH 公司提供。

THUNDER 成像系统使您能够实时观察清晰的细节和完好样本的深层,不会出现离焦模糊现象。 这些系统的清晰成像性能可从根本上改变您对模式生物、组织切片和类器官等 3D 细胞培养物成像时的工作方式。 与“标准的”宽场显微镜相比,您可以使用更厚的切片并对更大的结构成像。

在LAS X软件中同时捕捉两个通道或进行光谱发射扫描并应用通道分离,从而轻松分离活鼠皮层中表达的 GFP(绿色)和 YFP(红色)。

SP8 DIVE(Deep In Vivo Explorer)是首款具有光谱可调检测功能的多光子显微镜。 它为体内深度成像提供了最大的穿透深度和对比度。 使用 SP8 DIVE,您能够在观察的深度和微小的细节间进行权衡,并通过完美的分色对多个标志物成像。 它具有很高的精确度和灵敏度,是活神经元成像的理想之选。 

人类海马体。发育中的人脑内由Ki67(红色)、MCM2(品红色)和SOX2(绿色)标记的增殖神经元祖细胞。左图:宽场模式下采集的快速概览图。右图:共聚焦模式下的高分辨率扫描图像。图像由英国伦敦弗朗西斯·克里克研究所的博士生Piero Rigo提供。

Mica是徕卡第一款多模态显微成像分析中枢,将宽场和共聚焦成像以及AI支持的分析功能无缝结合在一起。所有这些都整合在一个能最佳保护样本的培养箱环境中。Mica运行快速且易于使用,采用FluoSyncTM技术,让您能够在宽场或共聚焦模式下同时观察4个标记。现在,您可以生成多4倍的100%时空相关的数据,在不移动样本的情况下从宽场切换至共聚焦模式。

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